El tampón de citrato sódico se utiliza para el aislamiento de ARN porque minimiza la hidrólisis básica de las cadenas de ARN. Esto lo convierte en un paso importante en la purificación del ARNm durante la investigación genómica o para estudiar la transcripción.
Los tampones basados en citrato también pueden ayudar a la detección de antígenos en preparaciones de tejidos fijados porque rompen los enlaces cruzados formados entre los antígenos y los medios de fijación.
Con la guía a continuación, prepare un tampón de citrato de sodio de pH 6. Las instrucciones no solo son fáciles sino también rápidas de ejecutar. Solo le tomará unos 10 minutos completar estos pasos.
Dos opciones para hacer el buffer
Hay dos maneras de hacer un buffer de citrato de sodio. Primero, determine si tiene tanto ácido cítrico como la base conjugada, citrato de sodio, para trabajar. Si solo tienes ácido cítrico, no es un problema. Aún puedes hacer el buffer.
Por otro lado, si tiene el ácido y la base, cree una solución madre de cada uno. Mezcle 21 gramos de ácido cítrico en 1 litro de agua destilada y 29,4 gramos de citrato de sodio en 1 litro de agua destilada.
Si solo tiene ácido cítrico, mezcle 2,1 gramos en poco menos de 1 litro de agua destilada y continúe con el siguiente paso.
Mezcla de ácido cítrico y soluciones de citrato de sodio
Ahora que ha creado su solución madre (si tenía un ácido y una base) o mezcló su ácido en agua destilada (si no lo hizo), puede concentrarse en sus soluciones.
Mezcle 82 mililitros de la solución de ácido cítrico con 18 mililitros de la solución de citrato de sodio.
Luego, haga que el volumen total de la mezcla sea justo por debajo de 1 litro con agua destilada. Deje suficiente volumen para permitir la adición de hidróxido de sodio (NaOH) en el siguiente paso.
Ajustando el pH
Mientras se agita suavemente la solución usando un agitador magnético, use hidróxido de sodio 1M para ajustar el pH de la mezcla a 6.0. Después de eso, haga un volumen final de la solución de hasta 1 litro con agua destilada usando un matraz aforado.
Lo que necesitas para hacer el buffer
No solo no te tomará mucho tiempo crear el tampón de citrato de sodio, sino que tampoco necesitarás muchos materiales para él. Con ácido cítrico, 1M de hidróxido de sodio, agua destilada y una sonda de pH calibrada, estará a medio camino. Usar citrato de sodio es opcional.
La fabricación del amortiguador también requerirá un cilindro graduado de 1 litro, un matraz volumétrico de 1 litro y tres botellas de medios de 1 litro. Por último, necesitará una barra de agitación magnética y un agitador magnético.
Si no tiene todos estos materiales, considere usar el laboratorio en su escuela o sitio de trabajo, para que no tenga que comprarlos usted mismo. También puede comprar estos materiales fácilmente en línea o visitar una tienda de productos especializados en su área.