Los fundamentos de las culturas de liofilización (liofilización)
La liofilización, también conocida como liofilización, es un proceso utilizado para preservar material biológico al eliminar el agua de la muestra, lo que implica primero congelar la muestra y luego secarla, bajo vacío, a temperaturas muy bajas. Las muestras liofilizadas pueden almacenarse mucho más tiempo que las muestras no tratadas.
Por qué se utiliza la liofilización
La liofilización, o la liofilización de cultivos bacterianos , estabiliza los cultivos para el almacenamiento a largo plazo al tiempo que minimiza el daño que puede causar el secado estricto de la muestra.
Muchos microorganismos sobreviven bien cuando se liofilizan y pueden rehidratarse fácilmente y cultivarse en medios de cultivo, después de períodos prolongados de almacenamiento.
La liofilización también se utiliza en las industrias biotecnológicas y biotecnológicas para preservar vacunas, muestras de sangre, proteínas purificadas y otros materiales biológicos.
Este breve procedimiento de laboratorio se puede utilizar con cualquier liofilizador disponible comercialmente para preservar su colección de cultivo.
El proceso de liofilización
El proceso de liofilización es en realidad una aplicación de un fenómeno físico llamado sublimación: la transición de una sustancia de estado sólido a estado gaseoso, sin pasar primero a través de la fase líquida. Durante la liofilización, el agua en la muestra congelada se elimina como vapor de agua, sin descongelar primero la muestra.
Errores comunes
Uno de los errores más comunes en lo que respecta a la liofilización es no conocer el punto de fusión de la muestra, lo que dificulta la elección del liofilizador correcto.
Sus muestras pueden derretirse durante el proceso. Otro error común es pensar que el frío es mejor cuando se liofiliza en un congelador tipo estante. Durante el secado primario, debe establecer la temperatura del estante justo por debajo de la temperatura eutéctica de la muestra. Debe haber suficiente calor para alentar a las moléculas de la muestra a moverse, pero evitar la fusión.
Un tercer error es usar el equipo incorrecto para sus muestras. Debido a que los congeladores se usan en una configuración grupal, debe saber lo siguiente antes de comprar uno:
- ¿Cuánta humedad se liofilizará?
- Qué es la muestra (y la temperatura eutéctica)
- Cómo usar correctamente el liofilizador
Si la unidad no se usa correctamente, podría arruinar todas las muestras. Lo que nos lleva a otro error común: no mantener la bomba de vacío. La bomba debe estar en excelente estado de funcionamiento para que funcione la liofilización. Hacer funcionar la bomba con el lastre de gas abierto 30 minutos antes y después del proceso de secado por congelación aumentará la vida útil de la bomba. Al abrir el balasto de gas, se eliminan los contaminantes de la bomba para evitar daños a los componentes internos. Debe verificar el aceite de la bomba con frecuencia para detectar decoloración y partículas, y cambie el aceite según sea necesario. Los cambios de aceite regulares mantienen la bomba tirando al vacío óptimo durante el proceso de congelación en seco.
Por último, tener los accesorios de secado por congelación incorrectos para su proceso de liofilización también puede ser un gran error. ¿Necesita una muestra de tapón bajo su aspiradora? Entonces se requiere una cámara de parada. ¿Estás liofilizando en frascos? Luego asegúrese de tener una cámara de secado con puertos.
Al evitar los errores anteriores, puede proporcionar un mejor cuidado para su liofilizador y su bomba, y tener mejores muestras cuando finalice su liofilización.
Referencias
Noticias de Labconco. "Top 5 errores cometidos en el proceso de liofilización". http://www.labconco.com/news/top-5-lyophilization-mistakes